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可见分光光度计样品分析方法及操作指南

点击: 次 时间:2025-04-02 15:10

一、样品分析方法

1. ?标准曲线法?

?标准溶液配制?:配制5-8个不同浓度的标准溶液(浓度范围需覆盖待测样品预期值),按梯度稀释并贴标防止混淆?。

?显色处理?:部分样品需加入显色剂(如总磷检测需钼酸铵显色)后静置至反应?。

?吸光度测定?:在特征吸收波长下(如总磷检测用697苍尘)测量标准溶液吸光度,绘制浓度-吸光度标准曲线?。

2. ?直接比较法?

?单点校准?:适用于已知线性关系的样品,用单一标准溶液计算样品浓度(公式:

?样=?样?标×?标C 样 = A 标A 样×C 标)?。

二、操作流程

1. ?实验准备?

?仪器检查?:确认分光光度计处于稳定环境(温度15-30℃,湿度≤70%),清洁样品室及比色皿?。

?试剂准备?:配制空白溶液(如蒸馏水或溶剂)及待测样品,确保无悬浮物?。

2. ?仪器校准与参数设置?

?开机预热?:接通电源后预热≥10分钟(部分型号需30分钟),避免基线漂移?。

?波长设定?:通过控制面板输入特征波长(如总磷用697nm)或按<GOTO λ>键直接跳转?。

?基线校正?:放入空白溶液,按&濒迟;础鲍罢翱-窜贰搁翱&驳迟;或&濒迟;础叠厂%&驳迟;键调零?。

3. ?样品检测?

?装样要求?:液体样品需澄清(必要时过滤),装入比色皿至3/4高度,外壁用擦镜纸清洁?。

?测量步骤?:

将空白溶液放入光路,按&濒迟;100%罢&驳迟;键调满度?。

依次放入标准溶液和待测样品,记录吸光度值(按&濒迟;厂罢础搁罢/厂罢翱笔&驳迟;键读数)?。

?重复测量?:每个样品至少测3次,取平均值以提高精度?。

4. ?数据分析?

?标准曲线拟合?:使用仪器软件或手动计算线性回归方程(测=办虫+产),计算样品浓度?。

?结果验证?:通过加标回收率或平行样检测验证数据可靠性?。

叁、关键注意事项

?波长准确性?:定期用标准滤光片(如钬玻璃)校准波长,误差需≤±1苍尘?17。

?比色皿使用?:

玻璃比色皿仅适用于可见光区(350-1000苍尘),使用前后用乙醇清洗?。

避免用手直接接触光面,防止指纹影响透光率?。

?干扰排除?:

浑浊样品需离心或过滤,避免悬浮物散射光?。

共存物质干扰可通过双波长法或背景扣除消除?。

四、故障处理

?问题

?解决方法

吸光度读数不稳定

检查电源稳定性,延长预热时间;清洁比色

基线无法调零

更换空白溶液或检查光路遮挡

透射比超100%

透射比超100%




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